Для успеха оплодотворения необходимо, чтобы сперма находилась в воспроизводительном тракте коровы еще до момента выхода яйцеклетки из яичника (овуляция). Слишком продолжительное пребывание спермы в матке и яйцеводе (более 16-20 ч) также нежелательно, т. к. ведет к получению нежизнеспособных эмбрионов (эмбриональной смертности). Овуляция у коров происходит обычно спустя 10-13 ч после окончания охоты.

Наилучшее время для осеменения коров - конец охоты (Несколько часов до овуляции). Наиболее точно можно выбрать лучшее время для осеменения путем прощупывания яичников через прямую кишку (осеменяют при наличии в яичнике зрелого, начинающего размягчаться фолликула). Данный способ требует высокой квалификации и большого опыта, в связи с чем чаще проводят осеменение только по признакам течки и охоты, стараясь уловить период наибольшего их проявления. Ввиду того что заранее неизвестна продолжительность охоты, при продолжающейся охоте осеменение желательно повторить (через 10-12 ч).

Установлено, что у большинства коров (80%) овуляция происходит в ночное время, поэтому коров, проявивших течку и охоту днем и вечером, надо осеменять в вечерние часы, т. е. в период, близкий к овуляции. На этом основании более эффективный способ - однократное (в сутки) искусственное осеменение.

Осемененных коров выдерживают отдельно от стада (на привязи) до окончания охоты. За осемененными коровами ведут внимательное наблюдение, пока через 2-3 месяца после осеменения не будет установлена стельность (посредством ректального исследования). Неоплодотворившиеся коровы приходят вновь в охоту через 3-4 недели.

Коров, пришедших повторно в охоту после осеменения в срок 3-4 недели (иногда позднее), надо непременно осеменять вновь, иначе они останутся яловыми. Следует иметь в виду, что уже наступившая беременность может самопроизвольно прекратиться (обычно в конце первого месяца) из-за гибели зародыша. Такая корова придет в охоту с запозданием в течение второго месяца после осеменения. Коров с запозданием повторной охоты в некоторых стадах бывает довольно много - в среднем около 20% (иногда до 50%).

Не следует, однако, допускать осеменения коров более чем в три последовательные охоты, т. к. дальнейшие повторные осеменения не только бесполезны, но и вызовут в организме коровы образование антител. Коров, пришедших в повторную охоту четвертый раз (после безрезультатного осеменения в три периода-охоты), необходимо передавать ветврачу для исследования и установления причин бесплодия с последующим лечением или выбраковкой. Если какие-либо отклонения от нормы отсутствуют, то следует провести осеменение спермой другого производителя или осеменить корову смешанной спермой нескольких быков (в неплеменных стадах). Этот способ дает положительный результат, если причина в индивидуальной генетической или иммунной несовместимости коровы и назначенного быка.